BeyoAP Alkaline Phosphatase，即BeyoAP堿性磷酸酶，是一種熱敏感的，可以催化DNA、RNA、核糖核苷酸和脫氧核糖核苷酸水解釋放5′或3′末端磷酸基團的酶，也可以脫去蛋白質絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸殘基上的磷酸基團。BeyoAP Alkaline
Phosphatase是一種新型堿性磷酸酯酶，在碧云天的各種內(nèi)切酶和PCR緩沖液中可保持100%活性，對于各種類型的DNA 5′末端的去磷酸化均可在37℃孵育10分鐘即可完成，并且75℃孵育5分鐘即可完全失活。
堿性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)常被稱作堿性磷酸酯酶(EC 3.1.3.1)，是一類水解酶，通過水解磷酸單酯將底物分子上的磷酸基團除去，并生成磷酸根離子和自由的羥基，其去磷酸化作用的底物包括核苷酸、蛋白質和生物堿等，并在堿性條件下最為有效。該酶是一組同功酶的統(tǒng)稱。常見的小牛腸堿性磷酸酶(Calf Intestinal Alkaline
Phosphatase, CIAP/CIP)被廣泛用于二抗等的標記最終用于蛋白和核酸等的檢測，也常用于DNA或RNA 5'和3'末端的去磷酸化(去單磷酸化)，特別是質粒的5'末端去磷酸化以避免質粒自連等。
經(jīng)限制性內(nèi)切酶酶切的質粒5′端帶有磷酸基團，在進行基因克隆時為避免質粒自連，可以使用BeyoAP Alkaline
Phosphatase去除5′末端磷酸基團。脫去5′末端磷酸基團的質粒不能發(fā)生自連。
特點：快速去磷酸化，只需37℃孵育10分鐘即可；快速失活，75℃孵育5分鐘即可完全失活；使用方便，在各種內(nèi)切酶和PCR緩沖液中保持100%活性，可以和質粒DNA的消化同時進行；操作步驟簡單，對于5′或3′突出末端、平端等各種DNA的脫磷酸化采用完全相同的操作步驟；可直接用于連接反應，經(jīng)BeyoAP Alkaline Phosphatase脫磷，并75℃孵育5分鐘失活后可直接用于后續(xù)的連接反應。
用途：通過去除載體或DNA片段5′末端的磷酸基團，防止載體或DNA片段自連；質粒DNA的同時內(nèi)切酶消化和脫磷；通過5′末端脫磷，為5′末端磷酸化放射性標記準備模板；去除DNA、RNA 5′或3′末端的磷酸基團；用于蛋白質絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸殘基的去磷酸化。
來源：大腸桿菌表達，表達基因為一種細菌堿性磷酸酯酶基因。
酶活性定義：37℃10分鐘內(nèi)，催化1μg 線性化的pUC19 DNA5′末端脫磷所需的酶量定義為一個活力單位。
純度：不含DNA外切酶和內(nèi)切酶，不含RNA酶。
酶儲存溶液：20mM HEPES-NaOH(pH7.4)，1mM MgCl₂，0.1mM ZnCl₂，0.1% Triton X-100，
50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X)：100mM Tris-HCl(pH8.0 at 37℃)，50mM MgCl₂，1M KCl，0.2% Triton X-100，10mM 2-mercaptoethanol，1mg/ml BSA。
失活或抑制：75℃加熱5分鐘可以使BeyoAP Alkaline Phosphatase失活。金屬離子螯合劑對BeyoAP Alkaline
Phosphatase有抑制作用。
包裝清單：

保存條件：
-20℃保存。
注意事項： 
酶使用時宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上，使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。