碧云天的AllProtect?動物組織核酸、蛋白穩(wěn)定保存液(AllProtect? Nucleic Acid and Protein Stabilization Reagent for Animal Tissue) ,簡稱AllProtect?試劑或AllProtect?,是一種用于采集動物組織時,僅需室溫操作,即可迅速穩(wěn)定和保存組織中核酸和蛋白的無毒無害液態(tài)試劑。本產(chǎn)品廣泛用于新鮮動物組織樣品或細(xì)胞樣品中RNA、DNA和蛋白的穩(wěn)定與保存。
本產(chǎn)品使用范圍廣。本產(chǎn)品能夠用于各種動物組織樣品中RNA、DNA和蛋白的穩(wěn)定和保存,如肝臟、腦、肺、脾臟、腎臟、心臟、肌肉、骨組織等,也可用于某些植物樣品的保存。AllProtect?試劑用于樣品蛋白的穩(wěn)定和保存時不會導(dǎo)致蛋白變性,后續(xù)可進(jìn)行Western Blot、SDS-PAGE、酶活力測定等全部常規(guī)蛋白實驗。樣品取出后可直接勻漿并按照常規(guī)方法進(jìn)行組織裂解和蛋白抽提。
本產(chǎn)品的效果和液氮凍存的效果一致。本產(chǎn)品可以迅速滲透到組織內(nèi)部,完全抑制RNase、DNase和蛋白酶(Proteinase),
避免RNA、DNA和蛋白降解,從而保持組織樣品中RNA、DNA和蛋白的完整性,并且和液氮一樣可以長期保存樣品中的RNA、DNA和蛋白。
本產(chǎn)品安全便捷。本產(chǎn)品無任何毒性和刺激性,可在室溫使用,確保了使用時的安全和便捷。和使用液氮相比,可以有效避免因使用超低溫的液氮而引起的凍傷、離心管爆裂等安全隱患,并且攜帶、運輸非常方便。
本產(chǎn)品適合普通新鮮組織樣品中RNA、DNA和蛋白的穩(wěn)定和保存,更加適合樣品收集后不能夠立即進(jìn)行RNA(包括miRNA等小RNA)、DNA或蛋白抽提的情況,特別適用于野外或臨床采集的樣品、大批量采集的動物組織樣品和不能立即凍存樣品的穩(wěn)定與保存。
在本產(chǎn)品中樣品的保存時間和存儲溫度相關(guān),例如37℃可保存1-2天,室溫可保存一周,4℃可以保存6個月,-20℃或更低溫度可以長期保存。具體如下表所示:
存儲溫度 | 37℃ | 25℃ | 4℃ | -20或-80℃ |
保存時間 | 1-2天 | 1周 | 6個月 | 長期 |
本產(chǎn)品在25℃浸泡保存小鼠肝組織7天后的效果如圖1和圖2所示。圖中分別對比了RNA、基因組DNA和總蛋白抽提后,得率、完整性、酶活性等的檢測結(jié)果。圖中實驗結(jié)果表明,AllProtect?對于樣品中RNA、DNA和蛋白保護(hù)作用與液氮凍存無顯著差異。
圖1.小鼠肝組織在不同保存條件下的RNA、DNA的抽提效果對比。各組樣品均約10mg,25℃分別用PBS和AllProtect?保存,或者液氮凍存,7天后分別使用碧云天的RNAeasy?動物RNA抽提試劑盒(離心柱式)(R0026)和基因組DNA小量抽提試劑盒(離心柱式)(D0063)進(jìn)行RNA和DNA抽提。A.各組抽提獲得RNA量的柱狀圖。B.抽提獲得的RNA樣品的電泳圖,各組均上樣2μl洗脫下來的RNA樣品(除PBS組外,每組約1.0μg RNA),并用1.2%甲醛變性瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測。本圖中使用的是DNA marker。C. 各組抽提獲得DNA量的柱狀圖。D.抽提獲得的DNA樣品電泳圖,各組均上樣2μl洗脫下來的DNA樣品(除PBS組外,每組約300ng DNA),并用1.0%瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測。 圖2.小鼠肝組織在不同保存條件下的總蛋白抽提效果對比。各組樣品均約10mg,25℃分別用PBS和AllProtect?保存,或者液氮凍存,7天后分別使用碧云天的Western及IP細(xì)胞裂解液(P0013)進(jìn)行總蛋白抽提。A. 各組抽提獲得的蛋白總量柱狀圖。B. 抽提獲得的蛋白樣品SDS-PAGE電泳后的考馬斯亮藍(lán)染色圖,各組按照約30μg蛋白上樣(PBS組除外),并利用12% SDS-PAGE凝膠進(jìn)行電泳和染色檢測。C. Western blot檢測各組β-Actin和Histone H3的表達(dá)情況。D. 利用半乳糖/半乳糖氧化酶檢測試劑盒測得的半乳糖氧化酶活力柱狀圖。 本產(chǎn)品保存的組織樣品能夠與大多數(shù)RNA、DNA和蛋白抽提的方法相兼容,特別適用于碧云天的RNAeasy?RNA抽提試劑盒(離心柱式)、基因組DNA抽提試劑盒(離心柱式)和蛋白抽提方法(詳見后附的相關(guān)產(chǎn)品)。使用時直接將樣品從AllProtect?試劑中取出,去除附著的溶液,少量的殘留不會影響后續(xù)抽提效果。
一個包裝的R0121-25ml可以用于約25個重量為100mg樣品的保存;一個包裝的R0121-100ml可以用于約100個重量為100mg樣品的保存。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
R0121-25ml | AllProtect?動物組織核酸、蛋白穩(wěn)定保存液 | 25ml |
R0121-100ml | AllProtect?動物組織核酸、蛋白穩(wěn)定保存液 | 100ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
室溫或4℃密封保存,一年有效。
注意事項:
本產(chǎn)品可以用移液器吸取,但由于本產(chǎn)品的粘稠度與甘油相近,請用剪刀適當(dāng)剪去槍頭的尖端部分后再進(jìn)行吸取。
本產(chǎn)品每次使用后應(yīng)當(dāng)擰緊瓶蓋或鎖住按壓泵,保證本產(chǎn)品的密閉保存,以免影響使用效果。
本產(chǎn)品若置于低于室溫的條件保存,試劑粘度會增加,需平衡至室溫(約25℃)后再使用。
實驗中獲得的組織樣品適當(dāng)處理大小后,應(yīng)迅速并完全浸泡在AllProtect?試劑中。
本試劑只可用于新鮮動物組織樣品中RNA、DNA和蛋白的穩(wěn)定與保存,不可用于已凍存過的樣品。凍存過的樣品由于融解過程緩慢,會導(dǎo)致AllProtect?試劑很難快速浸潤到組織內(nèi)部以阻止核酸和蛋白的降解。
用本產(chǎn)品保存后,樣品可能會變得微硬,為正?,F(xiàn)象,不會影響后續(xù)RNA、DNA或蛋白抽提時組織的勻漿、裂解等操作。
樣品如果需要在-20℃或-80℃長期保存,應(yīng)在4℃保存過夜或更長時間后才能再轉(zhuǎn)移至-20℃或-80℃保存,以保證
AllProtect?試劑更加充分有效地完全浸入組織內(nèi)部。
AllProtect?試劑保存的樣品置于-20℃或-80℃保存后,應(yīng)先解凍并平衡至室溫后再進(jìn)行取樣。AllProtect?保護(hù)的樣品盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù),以免發(fā)生降解。通常用于蛋白分析時(特別如酶活性分析),凍融次數(shù)不應(yīng)超過5次;用于RNA和DNA分析時,凍融次數(shù)可增加到15次。本產(chǎn)品本身通常不會影響酶活性,但對于反復(fù)凍融非常敏感的一些酶,本產(chǎn)品并不能緩解反復(fù)凍融對于這些酶活性的抑制作用。
用于植物樣品保存時,應(yīng)當(dāng)去除表面蠟質(zhì),確保AllProtect?試劑能充分進(jìn)入組織內(nèi)部。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。