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ApaI

ApaI (訂貨以英文為準)

編號:BYTD6049
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BYTD6049 碧云天 2000U ¥166.00
產(chǎn)品名稱 ApaI
中文名稱 ApaI

ApaI內(nèi)切酶為進口分裝,基本信息如下:

識別序列 緩沖液兼容性(%) 酶切溫度 失活條件 甲基化干擾?
GGGCC^C
C^CCGGG
1X B 1X G 1X O 1X R 1X Y 2X Y 37℃ 65℃ 
20min
有時有干擾
100 20-50 0-20 0-20 20-50 0-20

根據(jù)識別序列鄰近序列的不同,酶切效果受dcm methylase或CG methylase導致的DNA甲基化的影響。
酶儲存液組成為:10mM Tris-HCl(pH7.4 at 25℃),50mM NaCl,1mM DTT,1mM EDTA,0.2mg/ml BSA and 50% glycerol。
1X Buffer B組成為:10mM Tris-HCl(pH7.5 at 37℃),10mM MgCl2,0.1mg/ml BSA。
1X Buffer Y組成為:33mM Tris-acetate(pH7.9 at 37℃),10mM magnesium acetate,66mM potassium acetate,0.1mg/ml BSA。
酶切和連接效率:50倍過量的本內(nèi)切酶消化1小時,>95%被酶切的片段可以被連接并被重新酶切(recut)。
活性單位定義:在37℃,50微升反應體系中反應1小時,將1微克的λDNA完全分解的酶量定義為1個活性單位,即1U。
包裝清單:

產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝
D6049-1 ApaI(20U/μl) 2000U
D6010B 10X Buffer B 1ml
D6010Y 10X Buffer Y 1ml
說明書 1份

保存條件:
-20℃保存。
注意事項: 
內(nèi)切酶使用時宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。
如果發(fā)現(xiàn)預期的酶切位點不能切開,請確認是否存在甲基化干擾問題。
特別注意:本內(nèi)切酶在30℃孵育時酶活力可以提高2倍。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用說明:
1. 單酶切時可以參考如下反應體系進行:

待酶切DNA 不超過1μg
雙蒸水或Milli-Q水 適量
10X Buffer B 2μl
ApaI 0.5-1μl
總體積 20μl
37℃孵育1小時或更長時間

說明:請注意把Buffer和水等充分混勻后再加入內(nèi)切酶,加入內(nèi)切酶后可以用槍吹打或輕輕Vortex混勻。通常參考上述條件孵育1小時已經(jīng)足夠,但多孵育數(shù)小時甚至孵育過夜也不會產(chǎn)生負面影響。如果酶切較長時間甚至酶切過夜,可以使用更少量的酶。待酶切DNA量較大時,可以適當延長酶切時間或按比例放大酶切體系。
2. 雙酶切或多酶切時,需選擇適當?shù)目梢约嫒輧蓚€或多個內(nèi)切酶的緩沖液,然后參考上表設置反應體系。如果沒有合適的緩沖液可以選擇,可以在一種酶消化完畢后進行純化,純化完畢后再進行另外一種酶切反應。


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