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Annealing Buffer for RNA Oligos (5X)

Annealing Buffer for RNA Oligos(5X) (訂貨以英文為準(zhǔn))

編號(hào):BYTR0051
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BYTR0051 碧云天 1ml ¥117.00
產(chǎn)品名稱 Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)
中文名稱 Annealing Buffer for RNA Oligos (5X)

碧云天生產(chǎn)的Annealing Buffer for RNA Oligos(5X),即RNA寡核苷酸退火緩沖液,是一種經(jīng)過我們多次實(shí)驗(yàn)證實(shí)、可以用于RNA oligo退火的緩沖液。用于siRNA而合成的互補(bǔ)的RNA oligo可以用該退火緩沖液進(jìn)行退火,以形成雙鏈RNA。使用碧云天生產(chǎn)的Annealing Buffer for RNA Oligos(5X),可以有效避免RNA oligo自身形成發(fā)夾結(jié)構(gòu),有利于退火的正確進(jìn)行。
使用本試劑盒操作非常簡(jiǎn)單,只需把待退火的RNA oligo和Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)按照一定比例混合后,置于PCR儀上,約60分鐘即可完成。
Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)經(jīng)過特殊處理,不含RNase,可避免RNA的降解。
如果一次退火反應(yīng)體積為100微升,一個(gè)包裝的退火緩沖液可以進(jìn)行50次退火反應(yīng)。
包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝
R0051 Annealing Buffer for RNA Oligos(5X) 1ml
說明書 1份

保存條件:
-20℃保存,一年有效。
注意事項(xiàng):
Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)只適合于RNA oligo的退火,不適合用于DNA oligo 的退火。
由于RNA非常容易被降解,一定要嚴(yán)格遵守RNA的操作規(guī)范,防止RNase污染。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說明:
1. 把待退火的RNA oligo用DEPC水配制成200μM。溶解Annealing Buffer for RNA Oligos(5X),混勻備用。
2. 如下設(shè)置退火反應(yīng)體系:

DEPC水 30μl
Annealing Buffer for RNA Oligos(5X) 20μl
RNA oligo A(200μM) 25μl
RNA oligo B(200μM) 25μl
總體積 100μl

按照上述順序依次加入各種試劑,混勻。如果用的PCR儀沒有熱蓋,在反應(yīng)體系上加入一滴礦物油(mineral oil)以防止蒸發(fā)。
3. 如下設(shè)置PCR儀進(jìn)行退火反應(yīng):

步驟 溫度 時(shí)間 說明
1 90℃ 1分鐘 讓oligo充分變性
2 每5秒下降0.1℃,降至25℃ 約60分鐘 退火
3 4℃ 長(zhǎng)時(shí)間保持 暫時(shí)存放

注1:每5秒下降0.1℃,降至25℃的程序設(shè)置,以Bio-Rad的T100為例為:1. 90℃, 2:00; 2. 90o, 0.05, -0.1℃ per cycle; 3. GOTO step 2, 650X; 4. 4℃, ∞。
注2:如果所用的PCR儀不具備下降0.1℃的功能,也可以設(shè)置為每60秒下降1℃。程序設(shè)置以Bio-Rad的T100為例為:1. 90℃, 1:00; 2. 90℃, 1:00, -1℃ per cycle; 3. GOTO step 2, 65X; 4. 4℃, ∞。
注3:如果條件有限,也可以將水浴鍋加熱至90℃,把PCR管放在水浴鍋中,或者把煮沸的熱水加入到保溫杯或保溫瓶中,待水溫降到90℃時(shí)放入PCR管。所用水量控制在1-2小時(shí)內(nèi)自然降溫至25℃左右。此方法的退火效果可能會(huì)比使用PCR儀略差一些。
4. 退火結(jié)束后可以直接用于轉(zhuǎn)染細(xì)胞,也可以-20℃凍存?zhèn)溆谩?

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