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生物素標(biāo)記EMSA探針-按需制備(0.2μM)

產(chǎn)品編號(hào):BYTGSREQB 品牌:碧云天
產(chǎn)品特點(diǎn):
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BYTGSREQB 0.2μM ¥1631.00

生物素標(biāo)記EMSA探針-按需制備是按照用戶要求制備的用于EMSA(也稱gel shift)研究的并經(jīng)生物素(Biotin)標(biāo)記的雙鏈oligonucleotide。這個(gè)生物素標(biāo)記的雙鏈寡核苷酸含有用戶指定的序列。
本生物素標(biāo)記EMSA探針已經(jīng)過(guò)純化,可以直接用于EMSA結(jié)合反應(yīng)。
本生物素標(biāo)記EMSA探針可以和碧云天的化學(xué)發(fā)光法EMSA試劑盒(GS009)配套使用。
一個(gè)包裝的生物素標(biāo)記探針可以進(jìn)行約200-400個(gè)樣品的EMSA檢測(cè)。
包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝
GSREQB 生物素標(biāo)記EMSA探針-按需制備(0.2μM) 200μl
說(shuō)明書(shū) 1份

保存條件:
-20℃保存,一年有效。
注意事項(xiàng):
避免加熱到40℃以上,溫度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致雙鏈DNA探針解聚成單鏈。而單鏈無(wú)法用于EMSA研究。
對(duì)于基于生物素標(biāo)記的EMSA檢測(cè)的詳細(xì)操作可以參考碧云天的化學(xué)發(fā)光法EMSA試劑盒(GS009)的使用說(shuō)明。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
如需訂購(gòu)本產(chǎn)品,請(qǐng)下載碧云天EMSA探針按需制備專用產(chǎn)品訂購(gòu)單,填寫(xiě)完整后發(fā)送到service@beyotime.com即可。

使用說(shuō)明:
1. 本生物素標(biāo)記EMSA探針用于EMSA結(jié)合反應(yīng)時(shí),參考如下步驟進(jìn)行:
A. 如下設(shè)置EMSA結(jié)合反應(yīng):

陰性對(duì)照反應(yīng):
Nuclease-Free Water 7-7.5μl
EMSA/Gel-Shift 結(jié)合緩沖液(5X) 2μl
細(xì)胞核蛋白或純化的轉(zhuǎn)錄因子 0μl
生物素標(biāo)記探針 0.5-1μl
總體積 10μl
樣品反應(yīng):
Nuclease-Free Water 5-5.5μl
EMSA/Gel-Shift 結(jié)合緩沖液(5X) 2μl
細(xì)胞核蛋白或純化的轉(zhuǎn)錄因子 2μl
生物素標(biāo)記探針 0.5-1μl
總體積 10μl
探針冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng):
Nuclease-Free Water 4-4.5μl
EMSA/Gel-Shift 結(jié)合緩沖液(5X) 2μl
細(xì)胞核蛋白或純化的轉(zhuǎn)錄因子 2μl
未標(biāo)記的探針 1μl
生物素標(biāo)記探針 0.5-1μl
總體積 10μl
突變探針的冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng):
Nuclease-Free Water 4-4.5μl
EMSA/Gel-Shift 結(jié)合緩沖液(5X) 2μl
細(xì)胞核蛋白或純化的轉(zhuǎn)錄因子 2μl
未標(biāo)記的突變探針 1μl
生物素標(biāo)記探針 0.5-1μl
總體積 10μl
Super-shift反應(yīng):
Nuclease-Free Water 4-4.5μl
EMSA/Gel-Shift 結(jié)合緩沖液(5X) 2μl
細(xì)胞核蛋白或純化的轉(zhuǎn)錄因子 2μl
目的蛋白特異抗體 1μl
生物素標(biāo)記探針 0.5-1μl
總體積 10μl

注:生物素標(biāo)記EMSA探針的推薦用量為每個(gè)反應(yīng)0.5微升,如果檢測(cè)出來(lái)的目的蛋白的EMSA條帶偏弱,可以適當(dāng)加大生物素標(biāo)記EMSA探針的用量至0.75微升或1微升。
注2:對(duì)于冷競(jìng)爭(zhēng)時(shí)使用的未標(biāo)記的探針或未標(biāo)記的突變探針,使用量可以根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整使用的體積。推薦的用于冷競(jìng)爭(zhēng)的未標(biāo)記的探針或突變探針的用量為生物素標(biāo)記探針的50-100倍。
B.按照上述順序依次加入各種試劑,在加入標(biāo)記好的探針前先混勻,并且室溫(20-25℃)放置10分鐘,從而消除可能發(fā)生的探針和蛋白的非特異性結(jié)合,或者讓冷探針優(yōu)先反應(yīng)。然后加入標(biāo)記好的探針,混勻,室溫(20-25℃)放置20分鐘。
C.加入1μl EMSA/Gel-Shift上樣緩沖液(無(wú)色,10X),混勻后立即上樣。注意:有些時(shí)候溴酚藍(lán)會(huì)影響蛋白和DNA的結(jié)合,建議盡量使用無(wú)色的EMSA/Gel-Shift上樣緩沖液。如果對(duì)于使用無(wú)色上樣緩沖液在上樣時(shí)感覺(jué)到無(wú)法上樣,可以在無(wú)色上樣緩沖液里面添加極少量的藍(lán)色的上樣緩沖液,至可以觀察到藍(lán)顏色即可。
2.對(duì)于基于生物素標(biāo)記的EMSA檢測(cè)的更多詳細(xì)操作可以參考碧云天的化學(xué)發(fā)光法EMSA試劑盒(GS009)的使用說(shuō)明。

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