碧云天生產(chǎn)的BeyoAmp? Plus Extra-long DNA Polymerase，是一種通過(guò)基因重組改造而獲得的具有超強(qiáng)(4kb/min)、超長(zhǎng)(35kb)擴(kuò)增能力的高度熱穩(wěn)定的DNA聚合酶，具有擴(kuò)增速度極快，保真度極高，短時(shí)間內(nèi)即可輕松實(shí)現(xiàn)35kb λDNA片段擴(kuò)增等突出優(yōu)點(diǎn)(參考圖1)。推薦用于5kb甚至30kb以上長(zhǎng)片段的PCR擴(kuò)增。
BeyoAmp? Plus Extra-long DNA Polymerase使用單體酶完成超長(zhǎng)片段擴(kuò)增。同類(lèi)產(chǎn)品如NEB的LongAmp? Taq DNA Polymerase、Thermo的Scientific Extensor Long Range PCR Enzyme Mix、Promega的GoTaq? Long PCR Master Mix等進(jìn)行超長(zhǎng)片段擴(kuò)增大多采用雙酶體系，即結(jié)合具有強(qiáng)擴(kuò)增能力的DNA聚合酶和具有校對(duì)功能的DNA聚合酶來(lái)實(shí)現(xiàn)保真性高的長(zhǎng)片段擴(kuò)增，而B(niǎo)eyoAmp? Plus Extra-long DNA Polymerase和Thermo的GeneAmp? XL PCR Kit中使用的rTth DNA Polymerase XL (Extra Long)類(lèi)似，不需要任何其它酶或者蛋白、多肽等輔助因子，即可突破單體酶一步完成長(zhǎng)片段的擴(kuò)增。
BeyoAmp? Plus Extra-long DNA Polymerase擴(kuò)增速度極快。擴(kuò)增小于6kb的DNA片段時(shí)，延伸每1kb只需要15秒；擴(kuò)增大于6kb的DNA片段時(shí)，延伸每1kb也只需要30秒。BeyoAmp? Plus Extra-long DNA Polymerase由于其超快的擴(kuò)增速度，因而可以大大縮短超長(zhǎng)片段每個(gè)PCR循環(huán)的擴(kuò)增時(shí)間。本產(chǎn)品也同樣適用于短片段的擴(kuò)增，可以實(shí)現(xiàn)超快速的PCR擴(kuò)增。
BeyoAmp? Plus Extra-long DNA Polymerase是一種高保真DNA聚合酶。它不僅可以非常高效地催化5'至3'方向的依賴(lài)于DNA模板的脫氧核苷酸的聚合反應(yīng)，它同時(shí)還具有3'至5'的外切酶活性(proofreading activity)，它的錯(cuò)誤發(fā)生概率比Taq酶要低10倍，比pfu酶的保真性還要略高一些。它可以輕松勝任具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)的、非常長(zhǎng)的DNA片段的準(zhǔn)確擴(kuò)增，因此它是目的基因擴(kuò)增和克隆的理想選擇。
圖1. BeyoAmp? Plus Extra-long DNA polymerase以λDNA為模板，PCR擴(kuò)增不同長(zhǎng)度片段(5-35kb)的電泳圖。電泳采用0.8%瓊脂糖凝膠，1XTAE，100V電泳180分鐘。
BeyoAmp? Plus Extra-long DNA Polymerase的主要性能與Taq酶及同類(lèi)產(chǎn)品的比較請(qǐng)參考下表。
| Product Name | Concentration | Manufacture | Velocity | Target Size | Fidelity | Product end |
| Taq | 5U/μl | Beyotime/others | 1min/kb | <3kb | 2.3×10-5/nt/cycle | 3'overhangs |
| Pfu | 5U/μl | Beyotime/others | 2min/kb | <5kb | 2.6×10-6/nt/cycle | Blunt |
| Platinum Taq | 5U/μl | Thermo | 30s/kb | 15kb | 3.8×10-6/nt/cycle | 3'overhangs |
| Phusion HF | 2U/μl | Thermo | 15-30s/kb | 20kb | 4.4×10-7/nt/cycle | Blunt |
| LongAmp Taq | 2.5U/μl | NEB | 50s/kb | 30kb | 1.2×10-5/nt/cycle | 3'overhangs |
| Phusion HF | 2U/μl | NEB | 15-30s/kb | 20kb | 4.6×10-7/nt/cycle | Blunt |
| PfuUltra HF | 2.5U/μl | Agilent | 1-2min/kb | 17kb | 1.3×10-6/nt/cycle | Blunt |
| PfuUltra II FH | - | Agilent | 15-30s/kb | 19kb | 1.2×10-6/nt/cycle | Blunt |
| KOD Dash | 2.5U/μl | TOYOBO | 30s/kb | 18kb | 5.8×10-6/nt/cycle | 3'overhangs |
| KOD FX | 1U/μl | TOYOBO | 30s-1min/kb | 40kb | 2.1×10-6/nt/cycle | Blunt |
| BeyoFusion? | 2.5U/μl | Beyotime | 15-60sec/kb | >12kb | 4.4×10-7/nt/cycle | Blunt |
| BeyoFusion? Plus | 2.5U/μl | Beyotime | 15-60sec/kb | >12kb | 2.2×10-6/nt/cycle | 3'overhangs |
| BeyoAmp? | 2.5U/μl | Beyotime | 15-30sec/kb | 35kb | 2.3×10-7/nt/cycle | Blunt |
| BeyoAmp? Plus | 2.5U/μl | Beyotime | 15-30sec/kb | 35kb | 1.1×10-6/nt/cycle | 3'overhangs |
來(lái)源：BeyoAmp? Plus Extra-long DNA Polymerase通過(guò)大腸桿菌重組、表達(dá)、純化而獲得。
用途：超長(zhǎng)DNA片段的準(zhǔn)確高效PCR擴(kuò)增、常規(guī)高保真PCR、點(diǎn)突變、克隆用途的PCR擴(kuò)增等。BeyoAmp? Plus Extra-long DNA polymerase擴(kuò)增出來(lái)的DNA片段為帶A的粘端，可以直接用于常規(guī)的T載體克隆。
活性定義：One unit is defined as the amount of enzyme that will incorporate 10 nmol of dNTP into acid insoluble material in 30 minutes at 74℃.
純度：不含DNA內(nèi)切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，滿(mǎn)足常規(guī)PCR反應(yīng)要求。
酶儲(chǔ)存溶液：20mM Tris-HCl (pH 7.5), 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 200μg/ml BSA and 50% (v/v) glycerol。
失活或抑制：酚抽提可以使BeyoAmp? Plus Extra-long DNA polymerase失活。
包裝清單：
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 包裝 |
| D7215S-1 | BeyoAmp? Plus Extra-long DNA polymerase (2.5U/μl) | 80μl |
| D7215S-2 | 10X BeyoAmp? Plus Buffer | 400μl |
| — | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
保存條件：
-20℃保存。
注意事項(xiàng)：
PCR反應(yīng)非常靈敏，在使用BeyoAmp? Plus Extra-long DNA Polymerase進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)時(shí)請(qǐng)注意避免微量待擴(kuò)增DNA的污染，并盡量設(shè)置不加模板的空白對(duì)照。
本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
黨沛 
