碧云天的蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物(通用型, 50X) (Protease and phosphatase inhibitor cocktail for general use, 50X) 是一種通用型用于細(xì)胞或組織蛋白提取的蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物組合。本品含有一瓶蛋白酶抑制劑混合物(通用型, 50X) (100mM AEBSF, 15μM Aprotinin, 6.5mM Bestatin, 0.7mM E64, 0.5mM Leupeptin in DMSO)以及一瓶磷酸酶抑制劑混合物(50X) (250mM sodium fluoride, 50mM sodium pyrophosphate, 50mM β-glycerophosphate and 50mM sodium orthovanadate in H2O),并提供獨(dú)立包裝的0.05M EDTA。
細(xì)胞或組織提取物等樣品中含有許多內(nèi)源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易導(dǎo)致提取物中的蛋白降解或去修飾,從而影響后續(xù)的蛋白檢測(cè)。因此在提取物等樣品中添加適當(dāng)?shù)牡鞍酌?、磷酸酶等抑制劑是防止蛋白降解和去修飾的有效方法?br>
本產(chǎn)品為經(jīng)優(yōu)化和測(cè)試的用于常規(guī)細(xì)胞或組織蛋白提取等的蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物,包含了廣譜的絲氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白酶抑制劑/氨基肽酶抑制劑,以及絲氨酸/蘇氨酸、酪氨酸、酸性及堿性磷酸酶抑制劑。
本蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物含100mM AEBSF, 15μM Aprotinin, 6.5mM Bestatin, 0.7mM E64, 0.5mM Leupeptin, 250mM sodium fluoride, 50mM sodium pyrophosphate, 50mM β-glycerophosphate, 50mM sodium orthovanadate,分別配制在高純度DMSO和超純水中。EDTA為單獨(dú)包裝,以便選擇性使用。如用于檢測(cè)金屬蛋白酶活性,則不宜添加EDTA。
本產(chǎn)品使用便捷,通常以1:50的比例分別把蛋白酶抑制劑混合物(通用型, 50X),磷酸酶抑制劑混合物(50X)和0.05M EDTA加入裂解液中,即可用于常規(guī)的細(xì)胞或組織蛋白的提取,并有效抑制蛋白降解。
不同類型的蛋白提取物中含有不同類型的蛋白酶。例如,哺乳動(dòng)物細(xì)胞提取物中通常含有高豐度的絲氨酸蛋白酶,細(xì)菌細(xì)胞提取物通常含有較多的絲氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶,哺乳動(dòng)物組織提取物中主要含有絲氨酸、半胱氨酸和金屬蛋白酶,植物提取物中常含有大量的絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶,還有一些含有天冬氨酸蛋白酶。為此碧云天針對(duì)不同類型樣品的蛋白提取,提供了不同類型的蛋白酶、磷酸酶等抑制劑混合物以供選擇,具體請(qǐng)參考附表1。
本產(chǎn)品可以有效抑制常規(guī)的細(xì)胞或組織提取物中的各種蛋白酶(如絲氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、蘇氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶等)和磷酸酶(如絲氨酸/蘇氨酸、酪氨酸、酸性及堿性磷酸酶等)。其中AEBSF是一種水溶性的絲氨酸蛋白酶不可逆抑制劑,其抑制常數(shù)與PMSF和DFP的抑制常數(shù)相似,可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纖溶酶(plasmin)、激肽釋放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶,作為PMSF和DFP的替代物,AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液穩(wěn)定性更好。Aprotinin是絲氨酸蛋白酶的競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑;Bestatin是氨基肽酶可逆抑制劑;E64是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制劑;Leupeptin是絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶可逆抑制劑;Pepstatin A是天冬氨酸蛋白酶可逆抑制劑;EDTA作為螯合劑是金屬蛋白酶的可逆抑制劑;氟化鈉(sodium fluoride)是酸性磷酸酶可逆抑制劑;焦磷酸鈉(sodium pyrophosphate)是絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶不可逆抑制劑;β-甘油磷酸(β-glycerophosphate)是絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶可逆抑制劑;正釩酸鈉(sodium orthovanadate)是堿性磷酸酶和酪氨酸磷酸酶可逆抑制劑。各種抑制劑的具體信息請(qǐng)參考附表2。
蛋白酶、磷酸酶和去乙?;敢种苿┗旌衔锏谋容^和選擇請(qǐng)見(jiàn):https://www.beyotime.com/support/lysis-inhibitor cocktail.htm。
一個(gè)包裝的本產(chǎn)品通常足夠用于500ml裂解液的配制。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
P1046-1 | 蛋白酶抑制劑混合物(通用型, 50X) | 10ml |
P1046-2 | 磷酸酶抑制劑混合物(50X) | 10ml |
P1046-3 | 0.05M EDTA, pH 8.0 | 10ml |
— | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
保存條件:
-20℃保存,一年有效。
注意事項(xiàng):
本產(chǎn)品可以適當(dāng)分裝后保存,并應(yīng)在臨使用前添加到裂解液等適當(dāng)溶液中。
本產(chǎn)品提供了獨(dú)立包裝的EDTA,可以選擇性使用。例如,后續(xù)用于檢測(cè)提取液中金屬蛋白酶活性,則不宜添加EDTA。
本產(chǎn)品中含有的蛋白酶和磷酸酶抑制劑對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。